Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833) stomach: a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications / Estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833): uma fonte de proteases aspárticas para aplicações industriais e biotecnológicas

The viscera and other residues from fish processing are commonly discarded by the fishing industry. These byproducts can be a source of digestive enzymes with industrial and biotechnological potential. In this study, we aimed at the extraction, characterization, and application of acidic proteases from the stomach of Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). A crude extract from the stomachs was obtained and submitted to a partial purification process by salting-out, which obtained a Purified Extract (PE) with a specific proteolytic activity of 54.0 U·mg-1. A purification of 1.9 fold and a yield of 41% were obtained. The PE presents two isoforms of acidic proteases and a maximum proteolytic activity at 45 °C and pH 2.0. The PE acidic proteolytic activity was stable in the pH range of 1.5 to 7.0 and temperature from 25 °C to 50 °C. Purified Extract kept 35% of its proteolytic activity at the presence of NaCl 15% (m/v) but was totally inhibited by pepstatin A. Purified Extract aspartic proteases presented high activity in the presence of heavy metals such as Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+, and Cu2+. The utilization of PE as an enzymatic addictive in the collagen extraction from Nile tilapia scales has doubled the process yield. The results indicate the potential of these aspartic proteases for industrial and biotechnological applications.

As vísceras e outros resíduos do processamento de peixes são geralmente descartados pela indústria pesqueira. Esses resíduos podem ser uma fonte de enzimas digestivas com potencial industrial e biotecnológico. Neste estudo, objetivamos a extração, caracterização e aplicação de proteases aspárticas do estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). Um extrato bruto do estômago foi obtido e submetido a um processo de purificação parcial, que obteve um Extrato Purificado (EP) com uma atividade proteolítica específica de 54,0 U·mg-1. Foi obtida uma purificação de 1,9 vezes e um rendimento de 41%. O EP apresenta duas isoformas de proteases ácidas e atividade proteolítica máxima a 45 °C e pH 2,0. A atividade proteolítica do EP foi estável na faixa de pH de 1,5 a 7,0 e temperatura de 25 °C a 50 °C. O EP manteve 35% de sua atividade proteolítica na presença de NaCl a 15% (m/v), mas foi totalmente inibida pela pepstatina A. As proteases ácidas do EP apresentaram alta atividade na presença de metais pesados como o Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+ e Cu2+. A utilização de EP como aditivo enzimático na extração de colágeno a partir de escamas de tilápia do Nilo dobrou o rendimento do processo. Os resultados indicam um potencial dessas proteases para aplicações industriais e biotecnológicas.

Obtainment and characterization of digestive aspartic proteases from the fish Caranx hippos (Linnaeus, 1766) / Obtenção e caracterização de proteases aspárticas digestórias do peixe Caranx hippos (Linnaeus, 1766)

This work aimed to obtain aspartic proteases of industrial and biotechnological interest from the stomach of the crevalle jack fish (Caranx hippos). In order to do so, a crude extract (CE) of the stomach was obtained and subjected to a partial purification by salting-out, which resulted in the enzyme extract (EE) obtainment. EE proteases were characterized physicochemically and by means of zymogram. In addition, the effect of chemical agents on their activity was also assessed. By means of salting-out it was possible to obtain a purification of 1.6 times with a yield of 49.4%. Two acid proteases present in the EE were observed in zymogram. The optimum temperature and thermal stability for EE acidic proteases were 55 ºC and 45 °C, respectively. The optimum pH and pH stability found for these enzymes were pH 1.5 and 7.0, respectively. Total inhibition of EE acid proteolytic activity was observed in the presence of pepstatin A. dithiothreitol (DTT) and Ca2+ did not promote a significant effect on enzyme activity. In the presence of heavy metals, such as Al3+, Cd2+ and Hg2+, EE acidic proteases showed more than 70% of their enzymatic activity. The results show that it is possible to obtain, from the stomach of C. hippos, aspartic proteases with high proteolytic activity and characteristics that demonstrate potential for industrial and biotechnological applications.

Este trabalho objetivou obter proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico a partir do estômago do peixe xaréu (Caranx hippos). Para isso, foi obtido um extrato bruto do estômago, o qual foi submetido a uma purificação parcial por salting-out onde se obteve o extrato enzimático (EE). As proteases do EE foram caracterizadas físico-quimicamente e através de zimograma. Além disso, o efeito de agentes químicos sobre sua atividade também foi avaliado. Através de salting-out foi possível obter uma purificação de 1,6 vezes com rendimento de 49,4%. Foram observadas duas proteases ácidas presentes no EE através de zimograma. A temperatura ótima e a estabilidade térmica para as proteases ácidas do EE foram de 55 ºC e 45 °C, respectivamente. O pH ótimo e a estabilidade ao pH encontrados para estas enzimas foram o pH 1,5 e 7,0, respectivamente. Observou-se a inibição total da atividade proteolítica ácida do EE na presença de pepstatina A. O ditiotreitol (DTT) e o Ca2+ não promoveram efeito significativo na atividade enzimática. Na presença de metais pesados, como Al3+, Cd2+ e Hg2+, o EE manteve mais de 70% de atividade enzimática do EE. Os resultados mostram que é possível obter, a partir do estômago de C. hippos, proteases aspárticas com alta atividade proteolítica e características que demonstram potencial para aplicações industriais e biotecnológicas.

Obtainment and characterization of digestive aspartic proteases from the fish Caranx hippos (Linnaeus, 1766) / Obtenção e caracterização de proteases aspárticas digestórias do peixe Caranx hippos (Linnaeus, 1766)

This work aimed to obtain aspartic proteases of industrial and biotechnological interest from the stomach of the crevalle jack fish (Caranx hippos). In order to do so, a crude extract (CE) of the stomach was obtained and subjected to a partial purification by salting-out, which resulted in the enzyme extract (EE) obtainment. EE proteases were characterized physicochemically and by means of zymogram. In addition, the effect of chemical agents on their activity was also assessed. By means of salting-out it was possible to obtain a purification of 1.6 times with a yield of 49.4%. Two acid proteases present in the EE were observed in zymogram. The optimum temperature and thermal stability for EE acidic proteases were 55 ºC and 45 °C, respectively. The optimum pH and pH stability found for these enzymes were pH 1.5 and 7.0, respectively. Total inhibition of EE acid proteolytic activity was observed in the presence of pepstatin A. dithiothreitol (DTT) and Ca2+ did not promote a significant effect on enzyme activity. In the presence of heavy metals, such as Al3+, Cd2+ and Hg2+, EE acidic proteases showed more than 70% of their enzymatic activity. The results show that it is possible to obtain, from the stomach of C. hippos, aspartic proteases with high proteolytic activity and characteristics that demonstrate potential for industrial and biotechnological applications.

Este trabalho objetivou obter proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico a partir do estômago do peixe xaréu (Caranx hippos). Para isso, foi obtido um extrato bruto do estômago, o qual foi submetido a uma purificação parcial por salting-out onde se obteve o extrato enzimático (EE). As proteases do EE foram caracterizadas físico-quimicamente e através de zimograma. Além disso, o efeito de agentes químicos sobre sua atividade também foi avaliado. Através de salting-out foi possível obter uma purificação de 1,6 vezes com rendimento de 49,4%. Foram observadas duas proteases ácidas presentes no EE através de zimograma. A temperatura ótima e a estabilidade térmica para as proteases ácidas do EE foram de 55 ºC e 45 °C, respectivamente. O pH ótimo e a estabilidade ao pH encontrados para estas enzimas foram o pH 1,5 e 7,0, respectivamente. Observou-se a inibição total da atividade proteolítica ácida do EE na presença de pepstatina A. O ditiotreitol (DTT) e o Ca2+ não promoveram efeito significativo na atividade enzimática. Na presença de metais pesados, como Al3+, Cd2+ e Hg2+, o EE manteve mais de 70% de atividade enzimática do EE. Os resultados mostram que é possível obter, a partir do estômago de C. hippos, proteases aspárticas com alta atividade proteolítica e características que demonstram potencial para aplicações industriais e biotecnológicas.

Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833) stomach: a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications / Estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833): uma fonte de proteases aspárticas para aplicações industriais e biotecnológicas

The viscera and other residues from fish processing are commonly discarded by the fishing industry. These by products can be a source of digestive enzymes with industrial and biotechnological potential. In this study, we aimed at the extraction, characterization, and application of acidic proteases from the stomach of Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). A crude extract from the stomachs was obtained and submitted to a partial purification process by salting-out, which obtained a Purified Extract (PE) with a specific proteolytic activity of 54.0 U·mg-¹. A purification of 1.9 fold and a yield of 41% were obtained. The PE presents two isoforms of acidic proteases and a maximum proteolytic activity at 45 °C and pH 2.0. The PE acidic proteolytic activity was stable in the pH range of 1.5 to 7.0 and temperature from 25 °C to 50 °C. Purified Extract kept 35% of its proteolytic activity at the presence of NaCl 15% (m/v) but was totally inhibited by pepstatin A. Purified Extract aspartic proteases presented high activity in the presence of heavy metals such as Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+, and Cu2+. The utilization of PE as an enzymatic addictive in the collagen extraction from Nile tilapia scales has doubled the process yield. The results indicate the potential of these aspartic proteases for industrial and biotechnological applications.

As vísceras e outros resíduos do processamento de peixes são geralmente descartados pela indústria pesqueira. Esses resíduos podem ser uma fonte de enzimas digestivas com potencial industrial e biotecnológico. Neste estudo, objetivamos a extração, caracterização e aplicação de proteases aspárticas do estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). Um extrato bruto do estômago foi obtido e submetido a um processo de purificação parcial, que obteve um Extrato Purificado (EP) com uma atividade proteolítica específica de 54,0 U·mg-¹. Foi obtida uma purificação de 1,9 vezes e um rendimento de 41%. O EP apresenta duas isoformas de proteases ácidas e atividade proteolítica máxima a 45 °C e pH 2,0. A atividade proteolítica do EP foi estável na faixa de pH de 1,5 a 7,0 e temperatura de 25 °C a 50 °C. O EP manteve 35% de sua atividade proteolítica na presença de NaCl a 15% (m/v), mas foi totalmente inibida pela pepstatina A. As proteases ácidas do EP apresentaram alta atividade na presença de metais pesados como o Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+ e Cu2+. A utilização de EP como aditivo enzimático na extração de colágeno a partir de escamas de tilápia do Nilo dobrou o rendimento do processo. Os resultados indicam um potencial dessas proteases para aplicações industriais e biotecnológicas.

Obtainment and characterization of digestive aspartic proteases from the fish Caranx hippos (Linnaeus, 1766)

Abstract This work aimed to obtain aspartic proteases of industrial and biotechnological interest from the stomach of the crevalle jack fish (Caranx hippos). In order to do so, a crude extract (CE) of the stomach was obtained and subjected to a partial purification by salting-out, which resulted in the enzyme extract (EE) obtainment. EE proteases were characterized physicochemically and by means of zymogram. In addition, the effect of chemical agents on their activity was also assessed. By means of salting-out it was possible to obtain a purification of 1.6 times with a yield of 49.4%. Two acid proteases present in the EE were observed in zymogram. The optimum temperature and thermal stability for EE acidic proteases were 55 ºC and 45 °C, respectively. The optimum pH and pH stability found for these enzymes were pH 1.5 and 7.0, respectively. Total inhibition of EE acid proteolytic activity was observed in the presence of pepstatin A. dithiothreitol (DTT) and Ca2+ did not promote a significant effect on enzyme activity. In the presence of heavy metals, such as Al3+, Cd2+ and Hg2+, EE acidic proteases showed more than 70% of their enzymatic activity. The results show that it is possible to obtain, from the stomach of C. hippos, aspartic proteases with high proteolytic activity and characteristics that demonstrate potential for industrial and biotechnological applications.

Resumo Este trabalho objetivou obter proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico a partir do estômago do peixe xaréu (Caranx hippos). Para isso, foi obtido um extrato bruto do estômago, o qual foi submetido a uma purificação parcial por salting-out onde se obteve o extrato enzimático (EE). As proteases do EE foram caracterizadas físico-quimicamente e através de zimograma. Além disso, o efeito de agentes químicos sobre sua atividade também foi avaliado. Através de salting-out foi possível obter uma purificação de 1,6 vezes com rendimento de 49,4%. Foram observadas duas proteases ácidas presentes no EE através de zimograma. A temperatura ótima e a estabilidade térmica para as proteases ácidas do EE foram de 55 ºC e 45 °C, respectivamente. O pH ótimo e a estabilidade ao pH encontrados para estas enzimas foram o pH 1,5 e 7,0, respectivamente. Observou-se a inibição total da atividade proteolítica ácida do EE na presença de pepstatina A. O ditiotreitol (DTT) e o Ca2+ não promoveram efeito significativo na atividade enzimática. Na presença de metais pesados, como Al3+, Cd2+ e Hg2+, o EE manteve mais de 70% de atividade enzimática do EE. Os resultados mostram que é possível obter, a partir do estômago de C. hippos, proteases aspárticas com alta atividade proteolítica e características que demonstram potencial para aplicações industriais e biotecnológicas.

Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833) stomach: a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications

Abstract The viscera and other residues from fish processing are commonly discarded by the fishing industry. These by-products can be a source of digestive enzymes with industrial and biotechnological potential. In this study, we aimed at the extraction, characterization, and application of acidic proteases from the stomach of Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). A crude extract from the stomachs was obtained and submitted to a partial purification process by salting-out, which obtained a Purified Extract (PE) with a specific proteolytic activity of 54.0 Umg-1. A purification of 1.9 fold and a yield of 41% were obtained. The PE presents two isoforms of acidic proteases and a maximum proteolytic activity at 45 °C and pH 2.0. The PE acidic proteolytic activity was stable in the pH range of 1.5 to 7.0 and temperature from 25 °C to 50 °C. Purified Extract kept 35% of its proteolytic activity at the presence of NaCl 15% (m/v) but was totally inhibited by pepstatin A. Purified Extract aspartic proteases presented high activity in the presence of heavy metals such as Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+, and Cu2+. The utilization of PE as an enzymatic addictive in the collagen extraction from Nile tilapia scales has doubled the process yield. The results indicate the potential of these aspartic proteases for industrial and biotechnological applications.

Resumo As vísceras e outros resíduos do processamento de peixes são geralmente descartados pela indústria pesqueira. Esses resíduos podem ser uma fonte de enzimas digestivas com potencial industrial e biotecnológico. Neste estudo, objetivamos a extração, caracterização e aplicação de proteases aspárticas do estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). Um extrato bruto do estômago foi obtido e submetido a um processo de purificação parcial, que obteve um Extrato Purificado (EP) com uma atividade proteolítica específica de 54,0 Umg-1. Foi obtida uma purificação de 1,9 vezes e um rendimento de 41%. O EP apresenta duas isoformas de proteases ácidas e atividade proteolítica máxima a 45 °C e pH 2,0. A atividade proteolítica do EP foi estável na faixa de pH de 1,5 a 7,0 e temperatura de 25 °C a 50 °C. O EP manteve 35% de sua atividade proteolítica na presença de NaCl a 15% (m/v), mas foi totalmente inibida pela pepstatina A. As proteases ácidas do EP apresentaram alta atividade na presença de metais pesados como o Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+ e Cu2+. A utilização de EP como aditivo enzimático na extração de colágeno a partir de escamas de tilápia do Nilo dobrou o rendimento do processo. Os resultados indicam um potencial dessas proteases para aplicações industriais e biotecnológicas

Carnauba (Copernicia prunifera) straw as an alternative bedding material for dairy cows housed in a Compost barn system / [Bagana de carnaúba como material de cama alternativo para vacas leiteiras alojadas em sistema Compost barn]

The replacement of bedding in compost dairy barns (CB) comprises a recurrent management practice, but bedding materials are often not readily available in all regions and the choice of alternative materials is necessary. The objective was to evaluate the thermal attributes of carnauba straw (CS) bedding in compost dairy barn facilities. Environmental monitoring operations were performed at a commercial farm located in Northeast Brazil. Mini weather stations were used to evaluate environmental variables. The THI was evaluated as one of the comfort parameters. Analysis of the spatial distribution of bed surface temperature (BST) in the CB was performed using geostatistical techniques. The cows remained out of the comfort zone according to THI results. The BST indicated satisfactory performance and from the thermal point of view can be used as alternative bedding material in CB facilities. However, it was observed that the CS showed fast biomass degradation compared to conventional materials, widely known. In addition, inadequate temperature values (< 45°C) were found in the deeper of the CS bed, signaling higher risks of pathogenic microbial activity. Additional studies are needed for searching the proper management plans that increase the life span of the bed formed by carnauba straw.(AU)

A reposição de cama na instalação Compost Barn (CB) compreende uma prática recorrente de manejo, porém os materiais de cama muitas vezes não estão facilmente disponíveis em todas as regiões, sendo necessária a adoção de materiais alternativos. Objetivou-se avaliar os atributos térmicos da cama à base de bagana de carnaúba (BC) para instalações CB. Foram realizadas operações de monitoramento ambiental em uma fazenda comercial situada no nordeste do Brasil. Miniestações meteorológicas foram utilizadas para avaliação de variáveis ambientais. O ITU foi avaliado como um dos parâmetros de conforto. A distribuição espacial da temperatura superficial da cama (TSC) no galpão foi analisada usando técnicas da geoestatística. As vacas mantiveram-se fora da zona de conforto, conforme resultados do ITU. A TSC indicou desempenho satisfatório e, do ponto de vista térmico, pode ser utilizada como material alternativo para cama em instalações CB. Entretanto, observou-se que a BC apresentou rápida degradação da biomassa em comparação a materiais convencionais, amplamente conhecidos. Além disso, valores inadequados de temperatura (< 45°C) foram encontrados nas camadas profundas da cama de BC, sinalizando maiores riscos de atividade microbiana patogênica. Estudos adicionais tornam-se necessários para a busca de planos de manejo que aumentem o tempo de vida útil da cama formada por bagana de carnaúba.(AU)

Evaluation of corn hybrids for silage grown in different locations / Avaliação de híbridos de milho para silagem cultivados em diferentes locais

The aim of this study was to evaluate the yield, morphometric and chemical characteristics, and the digestibility of various corn hybrids cultivated in different locations for silage production. Four corn hybrids were grown: P2866H, P3456H, P30R50VYH and P4285YHR, in four locations, defined as farm A; B; C and D. The hybrid P4285YHR presented the highest plant and ear insertion heights (2.72m, 1.52m respectively), with a minimum registered height of 2.63 m and 1.42 m, for plant and ear insertion height, and for that reason it presented the highest yield of fresh biomass (78,089kg ha-1). The TND values showed trend very close to that observed in the DISMS of the whole-plant, with hybrid P3456H presenting the highest estimated value (68.74%), and the hybrid P4285YHR the lowest among them (65.25%). In general, lower fibrous carbohydrates and lignin content, higher fibrous carbohydrates content, together with satisfactory grains participation in the plant structure led to a greater dry matter digestibility. Hybrids with lower plant heights do not necessarily have lower dry biomass yields, but hybrids of greater height and with high stem and leaf participation tend to have a higher aFDN content and less dry matter digestibility.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho produtivo e as características morfométricas e químicas, além da digestibilidade de diferentes híbridos de milho cultivados em diferentes locais para produção de silagem. Foram cultivados quatro híbridos de milho: P2866H, P3456H, P30R50VYH e P4285YHR, em quatro locais, definidos como propriedades A; B; C e D. O híbrido P4285YHR apresentou as maiores alturas de planta e de inserção de espiga (2,72m, 1,52m, respectivamente), com altura mínima registrada, nos diferentes locais, de 2,63m e 1,42m, para altura de planta e inserção de espiga, e, por isso, apresentou o maior rendimento de biomassa fresca (78.089kg ha-1). Os valores calculados de NDT mostraram tendência muito próxima àquela observada na DISMS da planta inteira, tendo o híbrido P3456H apresentado o maior valor estimado (68,74%), e o híbrido P4285YHR o menor entre eles (65,25%). Em geral, menores concentrações de carboidratos fibrosos e lignina, maior teor de carboidratos fibrosos, juntamente com satisfatória participação de grãos na estrutura da planta, conduzem a uma maior digestibilidade da matéria seca. Híbridos com menores alturas de planta não necessariamente apresentam menores rendimentos de biomassa seca, mas híbridos de maior altura e com alta participação de colmo e folhas tendem a apresentar maior teor de aFDN e menor digestibilidade da matéria seca.(AU)

Sepsis due to Yersinia enterocolitica in an aborted equine fetus: case report / Sepse por Yersinia enterocolitica em um feto equino abortado: relato de caso

Yersinia enterocolitica is a bacterium with zoonotic potential and there are no previous records of this bacteria being isolated from aborted foals. This report aims to describe a case of sepsis due to Y. enterocolitica in a seven month old aborted equine. The fequinoetus was submitted to necropsy and samples of all the organs were collected for the histological exam. Samples of liver, lung, placenta, and stomach contents were collected for bacterial culture. Macroscopically, the liver was enlarged with yellowish heterogeneous color, heart with pale myocardial areas; lungs not collapsed, heavy and shiny, thickened umbilical cord covered with fibrin and pus. Histopathologically, there was moderate multifocal necrosuppurative myocarditis and thrombosis, moderate diffuse suppurative bronchopneumonia, mild multifocal fibrinonecrotic hepatitis, and moderate diffuse necrosuppurative omphalitis with intralesional bacterial myriads and thrombosis. Mild multifocal suppurative placentitis, nephritis, myositis, cystitis, and dermatitis were also observed, in addition to mild diffuse lymphoid rarefaction. The microbiological evaluation identified Y. enterocolitica in the liver, lung, and stomach fluid. This is the first report of sepsis due to Y. enterocolitica causing an abortion in a horse. This bacterium has zoonotic importance; therefore, it should be investigated in abortion in this species, serving as a differential diagnosis in reproductive disorders.(AU)

Yersinia enterocolitica é uma bactéria com potencial zoonótico, e não há informações desse agente como causa de abortamento em equinos. O objetivo deste relato é descrever um caso de sepse por Y. enterocolitica em um feto equino abortado aos sete meses. O feto foi submetido à necropsia, e amostras de todos os órgãos foram processadas para histopatologia. Para microbiologia, foram coletadas amostras de fígado, pulmão, placenta e conteúdo estomacal. Macroscopicamente, observou-se fígado aumentado com coloração amarelada heterogênea; coração com áreas pálidas no miocárdio; pulmões não colabados, pesados e brilhantes; e cordão umbilical espessado e recoberto por fibrina e pus. Na análise histopatológica, havia miocardite necrossupurativa multifocal moderada e trombose, broncopneumonia supurativa difusa moderada, hepatite fibrinonecrótica multifocal discreta e onfalite necrossupurativa difusa moderada com miríades bacterianas intralesionais e trombose. Observou-se também placentite, nefrite, miosite, cistite e dermatite supurativa multifocal discreta, além de rarefação linfoide difusa discreta. A avaliação microbiológica identificou Y. enterocolitica no fígado, no pulmão e no líquido estomacal. Este é o primeiro relato de sepse por Y. enterocolitica causando abortamento na espécie equina. Essa bactéria tem importância zoonótica, portanto deve ser investigada em casos de abortamento nessa espécie, servindo como diagnóstico diferencial em tal distúrbio reprodutivo.(AU)

Influence of different periods of pre-slaughter fasting on microbiological quality of bullfrog carcasses (Lithobates catesbeianus) / [Influência de diferentes períodos de jejum pré-abate na qualidade microbiológica de carcaças de rã-touro (Lithobates catesbeianus)]

The aim of this study was to evaluate the influence of different periods of pre-slaughter fasting (F1: 2 to 24 hours and F2: 48 to 72 hours) on the counts of hygiene indicator microorganisms and the presence of Salmonella spp. in carcasses of bullfrogs. Two different stages of the slaughter process were analyzed: after bleeding (A) and after the final carcasses cleaning (B). Samples from each fasting period were analyzed to count hygiene indicator microorganisms (n=30) and Salmonella spp. (n=140). For aerobic mesophilic microorganisms, the variation in fasting periods caused a reduction of 0.69 log10 CFU / g (P<0.05) in F2 when compared to F1 at point B of the slaughter. Coliforms at 35º C and Escherichia coli showed no differences (P >0.05) between the fasting analyzed periods. Considering the presence of E. coli, it was observed that F2 resulted in a reduction of 30% (P<0.05) positivity on point B. For Salmonella spp., the results showed that F2 contributed to an 11.5% reduction in the presence of this bacteria at point B. (P<0.05). Therefore, it is concluded that 48 to 72 hours of pre-slaughter fasting resulted in a positive impact on the microbiological quality of bullfrog carcasses.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a influência de diferentes períodos de jejum pré-abate (F1: duas a 24 horas e F2: 48 a 72 horas) nas contagens de micro-organismos indicadores de higiene e na presença de Salmonella spp. em carcaças de rãs-touro. Foram analisadas duas etapas do processo de abate: após a sangria (A) e após a toalete final da carcaça (B). As amostras de cada período de jejum foram utilizadas para contagem de indicadores de higiene (n = 30) e Salmonella spp. (n = 140). Para aeróbios mesófilos, a variação no tempo de jejum causou uma redução de 0,69 log10 UFC/g (P<0,05) em F2 quando comparado a F1 na etapa B do abate. Os coliformes a 35ºC e Escherichia coli não apresentaram diferenças (P>0,05) entre os dois períodos de jejum analisados. Considerando a presença de E. coli, F2 resultou em uma redução de 30% (P<0,05) de positividade na etapa B. Para Salmonella spp., os resultados mostraram que F2 contribuiu para uma redução de 11,5% na presença desse micro-organismo na etapa B. Portanto, conclui-se que 48 a 72 horas de jejum pré-abate tiveram um impacto positivo na qualidade microbiológica das carcaças de rã-touro.(AU)

Biochemical characterization of adenosine deaminase (CD26 EC 3. 5. 4. 4) activity in human lymphocyte-rich peripheral blood mononuclear cells

The conversion of adenosine to inosine is catalyzed by adenosine deaminase (ADA) (EC 3.5.4.4), which has two isoforms in humans (ADA1 and ADA2) and belongs to the zinc-dependent hydrolase family. ADA modulates lymphocyte function and differentiation, and regulates inflammatory and immune responses. This study investigated ADA activity in lymphocyte-rich peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) in the absence of disease. The viability of lymphocyte-rich PBMCs isolated from humans and kept in 0.9% saline solution at 4-8°C was analyzed over 20 h. The incubation time and biochemical properties of the enzyme, such as its Michaelis-Menten constant (Km) and maximum velocity (Vmax), were characterized through the liberation of ammonia from the adenosine substrate. Additionally, the presence of ADA protein on the lymphocyte surface was determined by flow cytometry using an anti-CD26 monoclonal human antibody, and the PBMCs showed long-term viability after 20 h. The ADA enzymatic activity was linear from 15 to 120 min of incubation, from 2.5 to 12.5 µg of protein, and pH 6.0 to 7.4. The Km and Vmax values were 0.103±0.051 mM and 0.025±0.001 nmol NH3·mg-1·s-1, respectively. Zinc and erythro-9-(2-hydroxy-3-nonyl) adenine (EHNA) inhibited enzymatic activity, and substrate preference was given to adenosine over 2′-deoxyadenosine and guanosine. The present study provides the biochemical characterization of ADA in human lymphocyte-rich PBMCs, and indicates the appropriate conditions for enzyme activity quantification.

Avaliação da atividade funcional dos neutrófilos sanguíneos em ovelhas primíparas e pluríparas da raça Lacaune / [Functional evaluation of blood neutrophils in primiparous and pluriparous Lacaune ewes]

This study aimed to evaluate the neutrophil oxidative metabolism and phagocytosis of Zymonsan particles of primiparous and pluriparous Lacaune ewes during the first 30 days after lambing. A total of 20 ewes were evaluated, 10 primiparous (GPR) and 10 pluriparous (GPL). Evaluation of basal oxidative metabolism was performed using the nitroblue tetrazolium (NBT) technique, stimulating neutrophil phagocytosis with Zymosan particles. Blood samples were collected at parturition day (M1) and 1, 3, 7, 15 and 30 days after parturition, corresponding to M2, M3, M4, M5 and M6, respectively. In relation to the groups, GPR presented lower oxidative basal metabolism neutrophils in M1 compared to M4, in M3 with M1, M2, M4 and M5. In M4 and M5 differences were found at all times and in M6 with M4 and M5. Higher percentage of neutrophils than phagocytes were found in M4, M5 and M6 than in M1 and M2 in GPL animals. At all times GPR presented a lower percentage of phagocytosis than GPL. Thus it is concluded that the immune response in pluriparous sheep was more efficient than in primiparous sheep.(AU)

Influência da somatotropina recombinante bovina no desenvolvimento folicular e na coleta de embriões em éguas / Influence of bovine recombinant somatotropin in the follicular development and embryo colletion in mares

Dez éguas, sem raça definida, foram submetidas a avaliações ultrassonográficas durante o intervalo interovulatório, avaliando-se folículos ≥ 5mm. Cinco éguas foram tratadas com 500mg de r-bST no primeiro e no 14º dia pós-ovulação (grupo GT), e as demais com soro fisiológico (grupo GC). Quando o folículo dominante atingiu diâmetro ≥ 40mm, foram induzidas com hCG e inseminadas 24 horas após, sendo submetidas à coleta de embrião seis dias após a ovulação. Os dados foram agrupados de acordo com o diâmetro do folículo dominante nas fases de emergência, divergência, dominância, pré-ovulatória, indução, inseminação e ovulação. Todas as éguas foram usadas duas vezes, no mesmo grupo. O GT apresentou crescimento folicular precoce para as fases de emergência, divergência, dominância e pré-ovulatória, assim como para o seu maior folículo subordinado, que cresceu mais cedo. As taxas de recuperação foram de 90% (GC) e 70% (GT), em 16 estruturas coletadas, obtendo-se uma não fecundada e um blastocisto inicial para o grupo GC; os demais, no estágio de mórula, apresentaram comportamento semelhante entre os grupos. Conclui-se que a r-bST influencia a dinâmica folicular de éguas, levando a uma antecipação do desenvolvimento folicular, que pode ser utilizada para encurtar o ciclo estral.(AU)

Ten undefined mare breeds were submitted to ultrasonographic evaluations during the interovulatory interval, evaluating follicles measuring ≥ 5mm. Five mares were treated with 500mg r-bST on the first and the 14th day after ovulation (TG group), and the others with saline (CG group). When the dominant follicle reached a diameter ≥ 40mm the ovulation was induced with hCG, and the mares were inseminated 24 hours later and submitted to embryo collection six days after ovulation. The data were grouped according to the diameter of the dominant follicle in the emergence, divergence, dominance, preovulatory, induction, insemination and ovulation phases. All mares were used twice, in the same group. The GT showed early follicular growth for the emergence, divergence, dominance and pre-ovulatory phases, as well as for its greater subordinate follicle, growing earlier. The recovery rates were 90% (CG) and 70% (TG), and 16 structures were collected, obtaining an unfertilized embryo and an initial blastocyst for the CG group, the others in the morula stage behaved similarly between the groups. It can be concluded that r-bST influences the follicular dynamics of the mares, leading to an anticipation of the follicular development that can be used to shorten the estrous cycle.(AU)

Trueperella pyogenes como causa de aborto em uma vaca - relato de caso / Trueperella pyogenes as an abortion cause in a cow - case report

Trueperella pyogenes é uma bactéria oportunista que causa mastite, metrite e abortos esporádicos em bovinos. Este trabalho relata um caso incomum de abort em uma vaca por Trueperella pyogenes. Um feto bovino, fêmea, mestiço Brahman, com oito meses de gestação, foi encaminhado para exame anatomopatológico e exames complementares. Na necropsia, evidenciou-se grande quantidade de líquido serossanguinolento e moderada quantidade de fibrina recobrindo a pleura visceral e o saco pericárdico. Os pulmões estavam difusamente avermelhados e consolidados, com áreas firmes esbranquiçadas ao corte de não mais de 1cm. No exame histopatológico, observou-se pneumonia necrossupurativa, pleurite fibrinopurulenta e placentite purulenta. No exame microbiológico, isolou-se T. pyogenes nas amostras de fígado, pulmões, conteúdo abomasal do feto e placenta. O feto foi negativo na PCR para Neospora caninum, Toxoplasma gondii e vírus da diarreia viral bovina (BVDV). Trueperella pyogenes geralmente causa broncopneumonia supurativa com formação de abscessos, porém, no presente feto abortado, observaram-se lesões macro e microscópicas comumente descritas em casos de aborto por Brucella abortus. Este estudo constata, então, a importância dessa bactéria como causa de aborto em bovinos, com lesões semelhantes à brucelose, destacando sua relevância dentro das causas de aborto em bovinos e o potencial zoonótico pouco explorado.(AU)

Trueperella pyogenes is an opportunistic bacterium associated with mastitis, metritis and occasional abortion in bovines. Here we report an uncommon case of abortion by T. pyogenes in a cow. An aborted female Brahman bovine fetus, at 8 months of gestational age was submitted for anatomopathological examination and complementary diagnostic tests. Macroscopic findings at necropsy included large amounts of free serum-blood fluid and moderate fibrin deposition covering both the visceral pleura and pericardial sack. The lungs were diffusely reddened and markedly consolidated, showing widespread smaller than 1cm, hard, white nodules. Necrosuppurative pneumonia, fibrinopurulent pleuritis, and purulent placentitis were the main histopathologic alterations observed. Trueperella pyogenes was isolated from liver, lungs, abomasa contents and placental samples. All tissue samples were PCR-negative for Neospora caninum, Toxoplasma gondii and bovine viral diarrhea virus (BVDV). Although T. pyogenes is often involved in suppurative bronchopneumonia and abscesses formation, macro and microscopic lesions in the present report were compatible with those commonly attributed to Brucella abortus fetal infections. Trueperella pyogenes is an important bovine pathogen with a neglected zoonotic potential being responsible for infections that can mimic other diseases' typical presentations.(AU)

Cranial cavity filled with cerebrospinal fluid in an otter (Lontra longicaudis) - case report / Cavitação craniana preenchida por fluido cerebroespinhal em lontra (Lontra longicaudis) - relato de caso

Computed tomography of the head of an otter with a history of incoordination, visual deficits, and seizures was performed. Intracranial images revealed a large non-enhancing fluid attenuating cystic lesion in the left frontoparietal region communicating with the left lateral ventricle and subarachnoid space. These findings are consistent with a congenital brain cavity filled by cerebrospinal fluid, with porencephaly being the most probable diagnosis based on the clinical and tomographic findings. The authors highlight the rarity of such a cystic lesion in wild animals, with this being the first report in otters.(AU)

Realizou-se o exame tomográfico do crânio de uma lontra com histórico de incoordenação, déficit visual e convulsões. Imagens intracranianas revelaram grande lesão cística não captante de contraste em região frontoparietal esquerda, apresentando comunicação com o ventrículo lateral esquerdo e espaço subaracnoidea. Esses achados foram consistentes com cavitação cerebral congênita preenchida por fluido cerebroespinhal, sendo porencefalia o diagnóstico de maior probabilidade com base nos achados clínicos e tomográficos. Destaca-se a raridade dessa condição em animais silvestres, sendo este o primeiro relato em lontras.(AU)

Participación de enfermeros(as) de la Región de las Américas en una capacitación virtual sobre liderazgo / Participation of nurses from the Region of the Americas in a leadership virtual training / Participação de enfermeiros(as) da Região das Américas em uma capacitação virtual sobre liderança

Resumen Objetivo Analizar la participación de los enfermeros(as) de la Región de las Américas en la iniciativa para desarrollar el liderazgo de enfermería en la Región, a través de un curso virtual de autoaprendizaje. Método Estudio descriptivo, cuantitativo con descripciones cualitativas de datos obtenidos del Campus Virtual de Salud Pública de la OPS/OMS por medio de la Encuesta de calidad del CVSP - cursos de autoaprendizaje del Curso Virtual de Liderazgo en Enfermería: Empoderamiento de los (las) enfermeros(as) líderes en Latinoamérica. Se calcularon medidas de estadística descriptiva. Resultados Participaron en este curso de agosto de 2015 a julio del 2018, tres mil 348 enfermeros. Del total, Ecuador, México y Colombia representan juntos el 83.1% de la participación. Solamente, 8.7% de los participantes en el curso reportaron específicamente que tienen cargos de liderazgo. El curso fue útil para las personas que tienen barreras relacionadas con el acceso a la educación permanente. Discusión La mayor participación en algunos países puede deberse a mayor difusión de estos cursos o del acceso a la plataforma virtual. El entorno virtual tiene beneficios y puede colaborar con el entrenamiento del recurso humano en salud, ya que muchos de ellos tienen barreras físicas para desarrollar sus habilidades profesionales. Conclusiones El entorno virtual colaboró, de forma significativa en la práctica de estos profesionales. Además, fue una iniciativa de fortalecimiento de la enfermería con enfoque en la formación de líderes y puede ser aprovechado para la formulación de futuros programas de educación.

Abstract Objective To analyze the participation of nurses from the Region of the Americas in a nursing leadership development initiative which uses a self-learning virtual training. Method This is a descriptive and quantitative study with qualitative descriptions on data obtained from the Virtual Campus for Public Health PAHO/WHO (VCPH) with the VCPH quality survey - self-learning courses of the Virtual Training of Nursing Leadership: empowerment of nurse leaders in Latin-America. Descriptive statistics were calculated. Results 3348 nurses participated in this course from august 2015 to july 2018. The nurses from Ecuador, Mexico, and Colombia represented 83.1% of the total participation. Only 8.7% reported having a leadership position specifically. The course was found useful among those persons with barriers related to the access to a permanent education. Discussion The larger participation in some countries could be the result of the broader diffusion and access to virtual platforms. The advantages of using a virtual environment include the possibility to further strengthen the training of health human resources, particularly of those with physical barriers related to the development of professional skills. Conclusions The training in a virtual environment strengthened the practice skills of the professionals enrolled in the course. Further education programs can take advantage of this kind of platforms to better prepare the future nursing leaders.

Resumo Objetivo Analisar a participação dos enfermeiros(as) da Região das Américas na iniciativa de desenvolver a liderança de enfermagem na Região, através de um curso virtual de autoaprendizagem. Método Estudo descritivo, quantitativo com descrições qualitativas de dados obtidos do Campus Virtual de Saúde Pública da OPS/OMS por meio da Enquete de qualidade do CVSP - cursos de autoaprendizagem do Curso Virtual de Liderança em Enfermagem: Empoderamento dos(as) enfermeiros(as) líderes na América Latina. Calcularam-se medidas de estatística descritiva. Resultados Participaram neste curso de agosto de 2015 a julho de 2018, três mil 348 enfermeiros. Do total, o Equador, o México e a Colômbia representam juntos o 83.1% da participação. Somente, 8.7% dos participantes no curso reportaram especificamente que têm cargos de liderança. O curso foi útil para as pessoas que têm barreiras relacionadas com o acesso à educação permanente. Discussão A maior participação em alguns países pode se dever a maior difusão destes cursos ou do acesso à plataforma virtual. O entorno virtual tem benefícios e pode colaborar com o treinamento do recurso humano em saúde, já que muitos deles têm barreiras físicas para desenvolver suas habilidades profissionais. Conclusões O entorno virtual colaborou, de forma significativa na prática destes profissionais. Aliás, foi uma iniciativa de fortalecimento da enfermagem com enfoque na formação de líderes e pode ser aproveitado para a formulação de futuros programas de educação.

Biology of Corythucha gossypii Fabricius, 1794 (Hemiptera: Tingidae) in Ricinus communis at different temperatures and thermal requirements / Biologia de Corythucha gossypii Fabricius, 1794 (Hemiptera: Tingidae) em Ricinus communis em diferentes temperaturas e exigências térmicas

Abstract We studied the biology of Corythucha gossypii in Ricinus communis under different temperatures in climatic chambers adjusted at 20, 23, 25, and 28 °C, 60 ± 10% relative humidity, and a 12-h photoperiod. The development period and viability of eggs, the development period and survival rate of nymphs, and egg-adult cycle of C. gossypii as well as the adult longevity and fecundity were estimated. The thermal requirements (K) and temperature-base (Tb) were estimated for each of the immature stages and for the eggs-adults period. The duration of the eggs and nymphs phases and the egg-adult cycle of the C. gossypii on castor bean leaves at 20-28 °C were 7.6-17 days, 10.2-27.5 days, and 16.9-44.5 days, respectively. The lower temperature inhibited the oviposition of C. gossypii, whereas the higher temperatures were most favorable for its development. The municipalities of the Bahia state of Brumado, Irecê, Itaberaba, Jacobina, and Senhor do Bonfim were estimated to have a high potential for the population growth of C. gossypii. However, a greater number of generations per year of C. gossypii were observed in the municipalities of Brumado and Itaberaba.

Resumo Estudamos a biologia de Corythucha gossypii em Ricinus communis sob diferentes temperaturas em câmaras climatizadas ajustadas as temperaturas de 20, 23, 25 e 28 °C, umidade relativa de 60 ± 10% e fotoperíodo de 12 horas. O período de desenvolvimento e a viabilidade dos ovos, o período de desenvolvimento e a taxa de sobrevivência de ninfas e do ciclo de ovo-adulto de C. gossypii, bem como a longevidade dos adultos e fecundidade foram estimados. As exigências térmicas (K) e as temperaturas-bases (Tb) foram estimadas para cada um dos estádios imaturos e para o ciclo de ovo-adulto. A duração das fases de ovos e ninfas e do ciclo de ovo a adulto de C. gossypii em folhas de mamona a 20-28 °C foram de 7,6-17 dias, 10,2-27,5 dias e 16,9-44,5 dias, respectivamente. A temperatura mais baixa inibiu a oviposição de C. gossypii , enquanto as temperaturas mais altas foram favoráveis ao seu desenvolvimento. Os municípios do estado da Bahia de Brumado, Irecê, Itaberaba, Jacobina e Senhor do Bonfim foram estimados para ter um alto potencial para o crescimento populacional de C. gossypii. No entanto, o maior número de gerações por ano de C. gossypii foi observado nos municípios de Brumado e Itaberaba.